携带CXCR4基因慢病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的体外实验

摘要：

背景：间充质干细胞在体内归巢主要调控因子是CXCR4，如何提高干细胞自身CXCR4的表达量是调节干细胞体内靶器官归巢能力的关键。<br>　　目的：构建CXCR4或GFP基因慢病毒表达载体，并观察其对骨髓间充质干细胞自身生长特性及分泌功能的影响。<br>　　方法：骨髓间充质干细胞应用慢病毒载体转染系统转染CXCR4基因达到过表达，同时单独转GFP基因作为对照。通过荧光显微镜、RT-PCR、免疫蛋白印迹方法验证病毒转染效率；流式细胞技术测定骨髓间充质干细胞的增殖、凋亡情况；Western Blot法测定间充质干细胞培养基上清中分泌蛋白及细胞因子变化。<br>　　结果与结论：慢病毒转染系统可以安全、有效地转染CXCR4基因或GFP基因到骨髓间充质干细胞。流式细胞仪检测显示过表达CXCR4的骨髓间充质干细胞增殖能力、生存能力加强，凋亡细胞减少(P<0.05)；细胞上清蛋白分析提示过表达CXCR4后，骨髓间充质干细胞培养上清内出现很多的蛋白因子升高(P<0.05)，其中大多数对细胞自身复制及免疫调节有益。结果表明慢病毒转染是一种安全高效的基因修饰手段，可以通过CXCR4基因修饰的方法提高骨髓间充质干细胞的生存能力、降低凋亡率，调节细胞保护性因子及免疫调节因子的分泌功能。

关键词：干细胞、骨髓干细胞、慢病毒、骨髓间充质干细胞、CXCR4、细胞增殖、免疫调节因子、辽宁省自然科学基金

分类号：R394.2

资助基金：辽宁省自然科学基金项目2013020199

在线出版日期：2014-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：6585-6590