CM-DIL和DAPI标记的骨髓间充质干细胞

摘要：

背景：在有关“细胞移植”的实验研究中，细胞标记技术被广泛应用。CM-DIL与DAPI是细胞标记实验中常用的荧光染料，目前两者的对比研究报道较少。<br>　　目的：从体外实验与体内实验两方面，探讨两种荧光染料CM-DIL与DAPI在标记大鼠骨髓间充质干细胞方面的差异。<br>　　方法：用贴壁培养法获取、培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞，分别用CM-DIL与DAPI进行标记，锥虫蓝计数检测骨髓间充质干细胞的活力；MTS法检测骨髓间充质干细胞的增殖能力并绘制增殖曲线；倒置相差荧光显微镜下动态观察标记后1，2，3代骨髓间充质干细胞的荧光衰减情况。结扎SD大鼠冠状动脉前降支致心肌梗死。1周后于心肌梗死边缘处注射CM-DIL与DAPI标记的细胞，细胞移植后3 d取材观察骨髓间充质干细胞的分布情况。<br>　　结果与结论：体外实验中，CM-DIL与DAPI标记的骨髓间充质干细胞两者的早期增殖能力均低于对照组；两种染料标记后的第1代细胞的荧光阳性率均为100%，但DAPI标记后的第3代细胞的荧光强度明显减弱。体内实验中，CM-DIL组与DAPI组心肌组织冰冻与石蜡切片均检测到集中分布的荧光；CM-DIL组冰冻切片红色荧光比DAPI组的蓝色荧光边界清晰并且背景低；CM-DIL组还可以通过含细胞核染色的封片剂封片排除荧光假阳性。可见，CM-DIL染料比DAPI更适合对骨髓间充质干细胞进行体内示踪。

关键词：干细胞、骨髓干细胞、CM-DIL、DAPI、荧光染料、标记、骨髓间充质干细胞、细胞活力、细胞增殖、心肌梗死、荧光表达、干细胞图片文章

分类号：R394.2

在线出版日期：2013-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7855-7860