晚期骨关节炎患者膝关节滑膜间充质干细胞的体外成骨分化

摘要：

背景：间充质干细胞是组织工程中常用的种子细胞，而来源于人膝关节滑膜组织的间充质干细胞能否作为骨组织修复与再生中合适的种子细胞还需要进一步验证。<br>　　目的：观察晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源的间充质干细胞体外向成骨细胞定向分化的潜能，对所诱导细胞的成骨特性进行鉴定。<br>　　方法：无菌条件下从行全膝关节置换的晚期骨关节炎患者膝关节腔内获取滑膜组织，Ⅰ型胶原酶消化分离获得有核细胞。以最适密度接种(200个有核细胞/cm2)，挑选单细胞克隆，筛选出滑膜间充质干细胞。基础培养基培养，传至第3代时改换为含地塞米松、β-甘油磷酸钠和抗坏血酸的成骨诱导培养基诱导培养。<br>　　结果与结论：体外分离培养的滑膜间充质干细胞早期可形成葵花样细胞集落，克隆样生长。传代至第3代，细胞呈成纤维细胞样生长，形态均一。滑膜间充质干细胞成骨诱导后呈典型的“铺路石样”成骨细胞形态，诱导至第7天碱性磷酸酶染色呈强阳性，碱性磷酸酶活性表达也在诱导7 d时达最高峰；诱导21 d茜素红染色可见大量钙结节形成；同时反转录PCR检测到Ⅰ型胶原、Runx2、骨结合蛋白和骨桥蛋白的表达在诱导后增加，21 d时表达最高。从晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织分离获得的滑膜间充质干细胞，在体外可成功诱导分化为成骨细胞，所诱导生成的细胞具有典型的成骨细胞特性。提示滑膜间充质干细胞有望成为骨组织工程理想的种子细胞来源，在骨组织的再生修复中发挥重要作用。

关键词：干细胞、干细胞培养与分化、滑膜组织、间充质干细胞、滑膜干细胞、膝关节、骨关节炎、成骨诱导分化、成骨细胞、国家自然科学基金、干细胞图片文章

分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目81201422；江苏省自然科学基金青年基金项目BK2012334；东南大学基本科研业务费“创新基金”项目3290002401；国家大学生创新训练计划1210286090；中国博士后科学基金项目和江苏省博士后科学基金特别资助项目2012M520983@@@@the National Natural Science Foundation of China for the;the Natural Science Foundation of Jiangsu Province for the Youth, No. BK2012334;the Innovation Fund of Southeast University Fundamental Research Project, No.3290002401;the National Undergraduate Training Programs for Innovation and Entrepreneurship, No.1210286090;China Postdoctoral Science Foundation&Jiangsu Provincial Postdoctoral Science Foundation, No.2012M520983

在线出版日期：2013-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：7840-7846