10.3969/j.issn.2095-4344.2013.28.002
miR-376b-3p可促进Runx2诱导C2C12细胞进行成骨细胞早期分化*★
背景:转录因子 Runx2是调节成骨分化及骨发育的关键因子,过表达 Runx2可诱导间质细胞 C2C12分化为成骨细胞,但相关诱导分化分子机制并不清楚。目的:分析 miR-376家族成员在 Runx2诱导 C2C12细胞进行成骨分化过程中的作用。方法:利用可诱导表达Runx2的细胞系C2C12/Runx2Dox,在不同的时间点通过荧光定量PCR方法检测miR-376家族成员表达情况。C2C12/Runx2 Dox胞标记基因碱性磷酸酶及骨钙素表达情况,并利用碱性磷酸酶染色法分析碱性磷酸酶活性。利用在线工具miRanda, miRWalk与TargetScan共同预测miR-376b-3p潜在靶基因。利用DAVID Bioinformatics Resources数据库对得到的靶基因进行功能聚类分析。结果与结论:在 Runx2诱导 C2C12进行成骨分化过程中 miR-376b-3p 表达显著增加,其他成员表达无明显变化。转染 miR-376b-3p mimic 可上调碱性磷酸酶表达,但对骨钙素表达无影响;转染 miR-376b-3p mimic也可增加碱性磷酸酶活性。靶基因功能聚类分析结果表明 miR-376b-3p 可参与机体骨骼发育过程,表明其在成骨分化过程中的作用。研究结果表明,Runx2通过上调 miR-376b-3p 的方式对与成骨分化相关基因的表达进行调节,以促进 C2C12进行成骨细胞的早期分化。细胞转染miR-376b-3p mimic后利用荧光定量PCR检测成骨细
组织构建、骨组织构建、Runx2、C2C12 细胞、miR-376b-3p、成骨分化、强力霉素、国家自然科学基金
R318(医用一般科学)
the National Natural Science Foundation of China, No.81071524*
2013-08-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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