人皮肤真皮组织中角朊干细胞样细胞的分离与培养*☆

摘要：

@@@@背景：皮肤真皮组织是皮肤损伤修复时除表皮基底层以外可形成表皮层结构的重要干细胞来源。目的：探索从人皮肤真皮组织中分离培养角朊干细胞样细胞的新方法。方法：将一定大小的成人腹部全层皮肤组织用 Dispase 过夜消化后去除表皮层结构，然后用0.1%Ⅰ型胶原酶过夜消化，离心分离以获取真皮来源总细胞。将分离的细胞用含有体积分数1% N2，2% B27，20μg/L表皮生长因子和40μg/L 碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12(1∶1)无血清培养液悬浮后以低密度接种于培养皿进行培养。采用RT-PCR和免疫细胞荧光染色法对其进行分析。结果与结论：RT-PCR分析结果显示所分离的真皮细胞中含有表达Lgr5和Lirg1等特异基因的毛囊来源干细胞；免疫细胞荧光分析结果显示其表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白14。在无血清条件下培养6 d时，可观察到表达细胞角蛋白14和整合素α6的“铺路石”样细胞克隆。进行传代培养后P1细胞表达角朊干细胞标志物CD29、细胞角蛋白14和P63。传代培养至P3，4时大部分细胞分化，不能继续传代。结果证实，以无血清培养液结合低密度培养法可直接从人真皮组织中有效地培养增殖活跃、细胞角蛋白14和P63阳性的角朊干细胞样细胞。

关键词：干细胞、干细胞培养与分化、人皮肤、真皮、汗腺、毛囊、角朊细胞、细胞角蛋白14、细胞角蛋白8、CD29、基因、其他基金、干细胞图片文章

分类号：R394.2

资助基金：吉林大学引进人才研究启动基金。

在线出版日期：2013-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：4264-4271