全骨髓细胞贴壁法分离与培养大鼠骨髓间充质干细胞的多向分化能力☆

摘要：

背景:分离培养纯度较高的骨髓间充质干细胞是对其进行深入研究的前提.
目的:观察全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特征.
方法:选取体质量为80-100 g雄性SD大鼠,采用全骨髓细胞贴壁培养法获取骨髓间充质干细胞.在取材过程中需严格掌握大鼠处死至将细胞悬液放入培养箱内的时间,一般控制在40 min以内.使用基础培养基冲洗骨髓腔时力度适中且在骨髓腔内旋转数次,可使骨髓细胞充分脱落,保证骨髓细胞的获得量.
结果与结论:原代骨髓间充质干细胞为贴壁生长的成纤维样细胞,传代后的细胞形态均一,呈漩涡状排列;第3代骨髓间充质干细胞的生长曲线呈S形,经历3个生长时期:潜伏期、对数生长期和停滞期;流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面抗原结果示:CD29+99.45%、CD34+1.45%、CD44+99.52%、CD45+1.41%;成骨、成脂诱导分化后,矿化结节被茜素红染成橘红色,脂滴被油红O染成红色.说明骨髓间充质干细胞能向成骨、成脂分化,具有多向分化潜能,符合国际细胞治疗学会间充质及组织干细胞委员会提出的鉴定动物来源骨髓间充质干细胞的最低标准.

关键词：骨髓间充质干细胞、全骨髓贴壁法、成骨分化、成脂分化、生物学特征、表面抗原、生长曲线、细胞形态

分类号：R394.2

在线出版日期：2012-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6685-6689