利用自体血清培养人外周血内皮祖细胞

摘要：

背景:传统方法培养人外周血来源内皮祖细胞操作复杂,费用大,细胞获得率较低.目的:利用自体血清培养人外周血来源内皮祖细胞,并鉴定其功能.方法:采用密度梯度离心法从人外周血分离得到单个核细胞,体外培养分化为内皮祖细胞.按培养基条件不同分为EGM-2MV组、添加自体血清组(M199+体积分数10%自体血清+胰岛素样生长因子)、添加胎牛血清组(M199+体积分数10%胎牛血清+血管内皮细胞生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+胰岛素样生长因子+表皮生长因子).观察内皮祖细胞增殖、迁移能力;采用细胞形态观察、双荧光染色法及流式细胞仪等技术对培养的内皮祖细胞进行鉴定.结果与结论:培养第7天,EBM-2MV组和添加自体血清组细胞增殖能力和迁移率都优于添加胎牛血清组(P < 0.05).每组细胞经结合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素双色荧光染色鉴定后双阳性率> 80%,免疫细胞化学检测显示每组细胞CD133,CD34和KDR的表达均为阳性.证实在M199培养液中添加自体血清是一种简单、高效的培养内皮祖细胞方法.

关键词：内皮祖细胞、细胞培养、人外周血、自体血清、干细胞培养、干细胞

所属期刊栏目：16

分类号：R394.2

资助基金：上海市科学技术委员会科研计划项目10411963900;课题名称:不同时相内皮祖细胞对雷帕霉素涂层支架植入后内膜损伤修复的实验研究

在线出版日期：2012-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5022-5027