肾移植后BK病毒感染者实时荧光定量PCR检测

摘要：

背景:对于BK病毒感染、BK病毒相关性肾病的认识缺乏规范的实验室诊断程序和标准化的无创性检验方法.目的:建立肾移植后患者尿液和外周血BK病毒感染负荷实时荧光定量PCR检测方法.方法:针对BK病毒基因组,自主设计特异性引物BKV-F和BKV-R,Taqman荧光探针BKV-P,Taqman荧光探针BKV-P的5'端标记有荧光基团,在除5'端外的任意一个位置上标记有淬灭基团;然后处理待测样本,进行PCR反应.结果与结论:将检测阳性的扩增产物进行基因测序,测序结果经BLAST比对后证实为BK病毒基因序列;利用上述方法对56份样本进行检测,其中,20份BK病毒血清样本及20份BK病毒尿液样本检测均为阳性,有S型扩增曲线.动态范围测定显示在103~1010 copies/mL之间标准曲线具有良好的相关性.5份健康人尿液样本,5份血液样本及6份临床常见的其他病原体血液样本检测均为阴性,无S型扩增曲线.结果表明该方法可进行定性、定量检测,特异性好,反应快速,一般30 min即可得到反应结果,并且成本低、假阳性少.

关键词：实时荧光定量PCR、BK病毒、尿液、外周血、引物、肾移植

所属期刊栏目：16

分类号：R617(外科手术学)

在线出版日期：2012-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：797-800