胚胎大鼠神经干细胞双向凝胶电泳方法的建立

摘要：

背景:神经干细胞是当今研究热点,双向电泳是蛋白质组学研究的技术基础,有必要建立稳定的神经干细胞蛋白质组双向凝胶电泳技术体系.目的:通过对神经干细胞双向凝胶电泳几个关键步骤的分析,建立稳定、重复性好的神经干细胞双向凝胶电泳的分离方法.方法:采用无血清体外细胞培养方法,培养胚胎大鼠神经干细胞并进行鉴定.提取样品蛋白并裂解,被动水化,采用不同IEF参数,使用PDQuest8.0软件对图谱进行分析和比较.观察不同等点聚焦参数下双向电泳图谱质量,蛋白质点的数目及重复性.结果与结论:不同IEF参数条件下的双向电泳图谱的质量有所不同,增加低电压的除盐步骤有助于去除电泳胶图上的横纹.在80 000 Vh聚焦总能量下,获得较理想的电泳图.通过选用适当的IEF参数.建立了适当的神经干细胞双向凝胶电泳方法.

关键词：胚胎大鼠、神经干细胞、蛋白质组学、双向凝胶电泳、神经退行性疾病

所属期刊栏目：14

分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金资助项目30771797;项目名称:叶酸对神经干细胞增殖分化作用的蛋白质组学的研究;天津医科大学科学基金2008Ky12;项目名称:同型半胱氨酸对大鼠学习记忆及ERK信号通路的影响

在线出版日期：2010-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6707-6710