新生小鼠肠侧群细胞的体外分离

摘要：

背景:目前分离干细胞的方法主要基于其细胞标志,近年来发展一种非基于细胞标志的干细胞分离方法,即利用荧光激活细胞分类法将组纵中干细胞和成熟细胞分离.目的:分离新生小鼠小肠黏膜来源的侧群细胞,探讨利用荧光活化细胞分选系统构建鼠肠干细胞群的可行性.方法:取新生小鼠小肠全长,制作小肠黏膜的类器官片段并制备成单细胞悬液.使用Hoechst33342利碘化丙啶染色后用流式细胞仪分选侧群细胞.提取细胞总RNA和蛋白,RT-PCR及Western-blot方法分别检测其中MSI-1 mRNA及MSI-1蛋白的表达水平.结果与结论:新生小鼠来源的小肠黏膜单细胞悬液中包含一个特定的细胞群体即侧群细胞,染包液中加入维拉帕米后,侧群细胞被阻断后消失.侧群细胞中显示有MSI-1mRNA及蛋门的表达.提示新生小鼠的小肠黏膜侧群细胞富集小肠黏膜干细胞,荧光活化细胞分选系统可用于构建鼠肠干细胞群.

关键词：肠干细胞、侧群细胞、小鼠、Musashi-1、荧光活化细胞分选

所属期刊栏目：14

分类号：R394.2

资助基金：广东省科技厅资助项目2008B030301285.a grant by Guangdong Provincial Science and Technology Ministry,No.2008B030301285

在线出版日期：2010-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：5115-5118