纳米高聚合物转导Survivin反义寡核苷酸对大肠癌的体内杀伤作用
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10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.045

纳米高聚合物转导Survivin反义寡核苷酸对大肠癌的体内杀伤作用

引用
背景:近年来纳米载体已被视为突破基因转移瓶颈最有前途的技术之一.聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)是一种新型的纳米材料,体内外实验表明,PAMAM比其他阳离子载体的基因转染效率高、细胞毒性低.目的:探讨PAMAM介导Survivin反义寡核苷酸(Survivin antisense oligonucleotide,Survivin-asODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用.设计、时间及地点:肿瘤基因治疗体内实验,于2008-02/08在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成.材料:人结直肠癌细胞株SW620购自中科院上海细胞所,PAMAM树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室提供,脂质体Lipolifectmain~(TM)2000购自美国Invitrogen公司.Survivin-asODN 由上海生工公司合成.方法:将PAMAM和阳离子脂质体分别与Survivin-asODN混合得到载反义基因转染复合物.透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度.将对数生长期的人结直肠癌细胞SW620细胞接种于18只Balb/C裸鼠皮下建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机均分为脂质体组、PAMAM组和空白对照组.分别注射脂质体-survivin-asODN转染复合物、PAMAM-survivin-asODN转染复合物、血清培养液,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达.主要观察指标:阳离脂质体-survivin-asODN复合物及PAMAM-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率,种植肿瘤生长抑制率,移植瘤细胞Survivin蛋白的表达及活性.结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-asODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组差异无显著性意义.PAMAM对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-asODN复合物组(P<0.05).PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-asODN复合物组(P<0.05).结论:PAMAM能将Survivin-asODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长.

聚酰胺-胺型树枝状高聚合物、结直肠癌、反义寡核苷酸、Survivin

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R318(医用一般科学)

国家自然科学基金资助项目30471599

2010-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

9393-9397

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中国组织工程研究与临床康复

1673-8225

21-1539/R

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2009,13(47)

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