五味子酮对APP转基因鼠神经干细胞分化中Tau蛋白过磷酸化水平的影响

摘要：

背景:华中五味子酮有强的抗氧化活性,可高效清除羟自由基和超氧阴离子,对处于活性氧应激状态下的细胞具有保护作用.神经元内神经原纤维缠结主要是由异常磷酸化的Tau蛋白组成,与阿尔茨海默病的严重程度呈正相关.目的:探讨五味子酮在APP转基因小鼠神经于细胞诱导分化成神经细胞的过程中对.Tau蛋白磷酸化的作用.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-07/2008-10在郑州大学医学实验中心完成.材料:自中国协和医科大学遗传动物中心购得APP基因突变小鼠30只,五味子酮由河南省中医研究院药物所提供.方法:剪取新生APP转摹因小鼠尾尖,常规提取DNA,采用PCR法检测动物是否携带有APP基因,APP转基因阳性鼠记为"APP+",APP转基因阴性鼠记为"APP-".分别取APP+鼠和APP-鼠海马部位脑组织,体外分离培养神经干细胞,并将纯化的神经干细胞向神经细胞方向诱导分化.将从APP+鼠来源的细胞分为五味子酮组、APP+细胞对照组,将APP-鼠来源的细胞设为APP-细胞对照组.五味子酮组向细胞培养液中加入终浓度为50 μmol/L的五味子酮溶液,余2组加入相同容积的PBS,培养24h.主要观察指标:免疫荧光化学和免疫印迹分析测定APP+、APP-细胞Tau蛋白在262、396位点的磷酸化水平.结果:与APP+细胞对照组比较,五味子酮组细胞荧光强度减轻,Tau[Ps262]、Tau[Ps396]的磷酸化水平均降低,且Tau[Ps396]位点的磷酸化水平降低尤为明显.APP-细胞对照组Tau[Ps262]、Tau[Ps396]磷酸化水平均较低.结论:在APP转基因小鼠神经干细胞诱导分化过程中,五味于酮可以明显降低Tau蛋白在396、262位点的磷酸化水平,减轻神经元损伤,但其磷酸化程度并未达到阴性细胞水平.

关键词：五味子酮、Tau蛋白、过磷酸化、APP转基因、小鼠

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分类号：R394.2

资助基金：河南省科技厅自然科学基金项目0611043000

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4490-4494