健骨颗粒含药血清对肿瘤坏死因子α诱导大鼠成骨细胞凋亡的影响

摘要：

背景:成骨细胞数量减少或凋亡进程加速,使骨形成少于骨吸收可导致骨质疏松的发生.肿瘤坏死因子а在去势大鼠或绝经后骨质疏松患者骨组织中呈高表达,在体外可刺激成骨细胞凋亡.健骨颗粒可降低骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子а水平.目的:验证健骨颗粒含药血清对肿瘤坏死因子а诱导的鼠成骨细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-07/2006-12在福建巾医学院骨伤系分子生物学实验室完成.材料:3月龄SD雌性大鼠40只用于制备含药血清,24 h SD乳鼠5只用于培养成骨细胞.健骨颗粒由煅狗骨、淫羊藿、山茱萸、党参等药味组成,原约材由福建省药材公司提供,福建中医药研究院中试车间加工制备,每克颗粒含原生药2.9 g.方法:用酶消化法培养成骨细胞.随机将40只SD大鼠分为高、中、低剂量含药血清组和生理盐水对照组,每组10只,分别将健骨颗粒按4,2,1 g/(kg·d)的药量灌服,对照组每天灌服2 mL生理盐水.连续给药7 d后腹主动脉取血得到健骨颗粒含药血清,将含药血清作用于成骨细胞48h后,再用肿瘤坏死因子а诱导24 h.运用TUNEL技术、流式细胞术、免疫细胞化学结合图像分析方法,检测成骨细胞凋亡情况.主要观察指标:①成骨细胞凋亡指数.②成骨细胞凋亡峰.③成骨细胞Bcl-2、Bax表达.结果:用肿瘤坏死因子а诱导的各组成骨细胞均出现凋亡现象,其中中、高剂量含药血清组的细胞凋亡指数和凋亡率明显低于其他组,而Bcl-2/Bax灰度比值却较其他组高(P<0.05),Bcl-2/Bax灰度比值与凋亡指数呈负相关(r=-0.757,P<0.01).结论:健骨颗粒对肿瘤坏死因子Q诱导的成骨细胞凋亡有一定的保护作用,可能通过提高Bcl-2的表达来实现.

关键词：成骨细胞、细胞凋亡、肿瘤坏死因子а、中药

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分类号：R681.4(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30572402;陈可冀中西医结合发展基金项目CKJ2008004;福建省中西医结合老年性疾病重点实验室开放课题2008J1004-26

在线出版日期：2009-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1227-1231