10.3321/j.issn:1673-8225.2008.03.022
脐血单个核细胞体外诱导分化为肝样细胞的可行性
目的:细胞移植为重度肝损伤治疗提供了一条新的途径,但肝细胞来源仍是一个未解决的问题.实验采用体外培养体系,观察人脐血单个核细胞是否可以诱导分化为肝样细胞,以期为治疗肝脏疾病提供了新的细胞来源. 方法:实验于2006-10/2007-08在解放军第一二三医院南京军区肝病中心实验室完成.①实验材料:脐血由蚌埠解放军123医院妇产科提供,产妇及家属对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准.②实验方法:分离获得脐血单个核细胞后,将其分组培养:对照组不加细胞因子,实验组加入重组人肝细胞生长因子、重组人成纤维生长因子4和重组人制瘤素.③实验评估:于诱导前及诱导后第7,14,21,28天采用免疫细胞化学染色检测甲胎蛋白、细胞角蛋白18、白蛋白和肝细胞抗体的表达,应用流式细胞仪检测细胞中白蛋白表达,放射免疫法检测细胞培养液中甲胎蛋白的分泌水平. 结果:①免疫细胞化学染色显示,实验组第7天可见甲胎蛋白染色阳性细胞,第21天后染色基本为阴性,第7天未检测到细胞角蛋白18和白蛋白阳性表达,随着诱导时间的延长,呈阳性表达,阳性率逐渐增高.对照组染色均呈阴性.②实验组培养第21天时检测到糖原染色阳性细胞,28 d时呈强阳性表达.对照组糖原染色呈阴性.③流式细胞仪检测实验组白蛋白阳性细胞比例逐渐增高,第28天达80%.放射免疫法检测7 d的甲胎蛋白水平达到最高,与诱导前和对照组差异显著(P < 0.05).结论:在特定细胞生长因子诱导下,脐血单个核细胞能够分化为肝样细胞.
单个核细胞、分化、肝细胞
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R394.24
安徽高校首批科技创新团队基金;安徽省研究实验基地优秀中青年科研带头人基金200622805
2008-05-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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