人类外周血染色体G显带的改良方法

摘要：

背景:染色体G显带常规方法操作繁琐、费时、效果较差,不利于临床染色体病的检查和教学科研等.目的:寻找提高染色体G显带效果的方法.设计:观察性实验.单位:新乡医学院.材料:实验于2001-01/2005-01在新乡医学院形态实验室完成.取新乡医学院第三附属医院妇产科2001-2004年门诊不孕不育和不良生育史患者外周血共376份.RPMl1640培养液(GIBCO公司),20%小牛血清,秋水仙素,0.075 mol/L KCl,甲醇,冰醋酸,胰蛋白酶(SIGMA公司),Giemsa染液.方法:改良的人类外周血染色体制备技术及G显带方法:操作步骤同常规方法,只是将部分影响因素做了调整,如秋水仙素作用时间调整到终止培养前2 h,加入1 mL固定液(甲醇:冰醋酸=2∶1)进行预固定,混匀后以1 500 r/min离心10 min.再离心后视细胞多少加新鲜固定液,制成细胞悬液,滴片.将上述玻片标本置500℃烤箱中一两小时,自然冷至37℃后,浸入胰蛋白酶液中消化3～5 min左右,立即移入Giemsa染液(用1份Giemsa原液加9份pH为6.8的磷酸缓冲液配制)中染色10 min,镜检计数,共观察3 000分裂相数,计算标本的400～600条分裂相的百分率和分散良好百分率.染色体分散良好指染色体分散后没有重叠,数目完整,随体和着丝点明显,着色鲜明,形状清晰,且各色染色体处于同一平面上.分裂相百分率=400～600分裂相细胞数/观察细胞数×100%.主要观察指标:标本的400～600条分裂相百分率和分散良好百分率.结果:常规方法400～600条分裂相占52%,分散良好率68%;改良方法400～600条分裂相占75%,分散良好率86%,两组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:改良方法获得的染色体分裂相多,分散良好,长短适中,Giemsa染色显示带纹清晰.

关键词：染色体、G显带、秋水仙素、固定液

所属期刊栏目：11

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2007-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2185-2186,2193