转化生长因子β调节体外培养人成骨细胞结缔组织生长因子mRNA的表达

摘要：

目的:观察转化生长因子β对体外培养人成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响.方法:实验在青岛海慈医疗集团检验科完成.选择2005-02/03在青岛海慈医疗集团骨科住院的无其他疾患的骨折患者3例,年龄30～50岁,经患者知情同意后,取其髂骨松质骨,剪碎,Ⅳ型胶原酶消化后,将骨片贴于25 cm2培养瓶,加入MEM培养液约15 d后,可见细胞游出,约25 d达汇片,胰酶消化,按1×106个细胞接种培养后第2天,换含1 g/L BSA MEM培养液继续培养24 h后,加入10 ng/L转化生长因子β干预培养0,3,6,12,24 h,或在转化生长因子β作用峰值时,分别给予不同浓度(0,5,10,25 ng/L)干预,抽提总RNA,采用半定量反转录-聚合酶链反应和Northern blot法检测干预后成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达水平.结果:①半定量反转录-聚合酶链反应检测转化生长因子β对体外培养成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响:与0 ng/L对照组相比,5,10和25 ng/L转化生长因子β干预后结缔组织生长因子mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),呈明显剂量依赖关系;10 ng/L转化生长因子β干预6 h时转化生长因子β上调作用达高峰(P＜0.01),然后下降,至24 h时转化生长因子β对结缔组织生长因子的上调作用基本消失(P＞0.05).②Northern blot法检测转化生长因子β对体外培养成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响:与0 ng/L对照组相比,10和25 ng/L转化生长因子β干预后结缔组织生长因子mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),但无明显剂量依赖关系(P＞0.05);10 ng/L转化生长因子β干预6 h时转化生长因子β上调作用达高峰(P＜0.01),然后下降,至24 h时转化生长因子β对结缔组织生长因子的上调作用基本消失(P＞0.05).结论:转化生长因子β可呈剂量依赖性上调人成骨细胞结缔组织生长因子mRNA的表达.

关键词：转化生长因子β、结缔组织、成骨细胞

所属期刊栏目：10

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：94-96