皮肤组织工程中人表皮干细胞的体外培养及分化特性研究

摘要：

目的:探索人表皮干细胞( keratinocyte stem cell, KSC)的筛选方法、体外培养条件及生长分化特性. 方法:由包皮消化获得表皮细胞,以低密度单克隆筛选法挑取 KSC克隆,并以挑取克隆传代及子代细胞混合传代两种不同的方法持续传代培养,采用 3种不同的滋养细胞.计算每代 KSC子代细胞的克隆形成率( colony forming efficiency,CFE)以及整合素β 1及外皮蛋白的表达情况. 结果:将 KSC克隆的子代细胞混合消化传代培养, CFE会逐渐下降,从最初的 95%以上降至第 6代时的 25%左右.每代均可见 3种处于不同分化状态的克隆混合生长,即干细胞克隆(绝大部分细胞未分化,整合素β 1阳性、外皮蛋白阴性)、短暂增殖克隆(部分细胞进入终末分化)、终末分化克隆(所有细胞均发生终末分化,外皮蛋白阳性、整合素β1阴性).以挑取克隆传代法传代培养,其 CFE仍能保持在 95%以上并能持续传代. 结论:以低密度单克隆筛选法可成功地筛选出 KSC克隆并能持续传代培养,多种成纤维细胞可作为培养 KSC的滋养细胞. KSC在体外会分裂增殖并逐渐分化,但干细胞的数量比例可以保持在较高水平.

关键词：生物医学工程、表皮、干细胞、细胞培养、细胞分化

所属期刊栏目：8

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金30277903

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：220-222