SARS-CoV S蛋白全长基因克隆及其表达的初步研究

摘要：

目的:克隆表达 SARS-CoV S蛋白,构建 SARS全长基因疫苗. 方法:从 SARS病毒的总 cDNA中以 PCR方法扩增编码人 SARS-CoV S1和 S2蛋白的编码序列,再将二者分别克隆入真核表达载体 pVAX1,构建重组表达载体.然后进一步将 S1和 S2连接到 pVAX1中.酶切和测序鉴定阳性克隆.采用脂质体法转染 Vero E6细胞,用 Western检测 S蛋白的表达. 结果:PCR方法分别扩增出了 1 900 bp和 1 800 bp左右的基因片段,两片段插入 pVAX1构建重组表达载体后,经序列测定证实该插入片段为 SARS病毒 S蛋白编码序列.将重组子转染 Vero E6细胞,收集细胞总蛋白, Western检测获得特异蛋白带. 结论:成功克隆并表达了 SARS-CoV S蛋白,为其作为 SARS基因疫苗研究打下基础.

关键词：SARS病毒、S蛋白、Vero E6细胞、基因疫苗

所属期刊栏目：7

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

在线出版日期：2003-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：2932-2933