siRNA阻断PRKC?表达对人卵巢癌细胞株SKOⅤ3迁移和侵袭的影响

摘要：

目的：探讨PRKC?在卵巢癌迁移和侵袭中的作用。方法：生物信息学分析PRKC?在卵巢癌中的表达,Real-time PCR和Western blot法检测卵巢癌细胞株中PRKC?的表达情况,设计针对PRKC咨的siRNA并转染SKOⅤ3卵巢癌细胞,观察转染后SKOⅤ3细胞中PRKC咨基因表达情况,以及SKOⅤ3细胞的迁移、侵袭能力的变化,并检测PRKC咨基因敲减后其下游转移相关效应分子MMP10的表达。结果：PRKC咨在卵巢癌芯片( TC-GA 和 GDS3592)中的表达与正常卵巢组织比较,表达差异>2倍( P<0.0001和 P=0.0078)。与HOSE细胞相比,ES2、CAOⅤ3、OⅤCAR3、SKOⅤ3、A2780卵巢癌细胞株中存在PRKC?mRNA和蛋白水平的高表达,其中SKOⅤ3细胞中PRKC?表达水平最高。 PRKC?特异性的siRNA-1和siRNA-2均能有效抑制SKOⅤ3细胞中PRKC? mRNA和蛋白表达, mRNA水平抑制效率分别为(80.5±10.23)%、(74.6±12.48)%(P<0.01),在蛋白水平抑制效率分别为(71.37±11.34)%、(68.22±12.19)%(P<0.05)。细胞划痕实验显示, PRKC咨siRNA明显降低了SKOⅤ3细胞的迁移能力,抑制效率分别为(54.31±12.87)%、(45.25±14.02)%(P<0.05)；Transwell实验显示,PRKC?siRNA明显降低了SKOⅤ3细胞的侵袭能力,分别降低了57.48%和38.38%( P<0.05)；PRKC?siRNA明显抑制了转移相关效应分子MMP10在mRNA和蛋白水平表达,mRNA水平分别下调(56.76±13.83)%、(52.99±14.38)%(P<0.05),蛋白水平分别下调(35.65±9.10)%、(37.14±14.26)%(P<0.05)。结论：PRKC?在卵巢癌中高表达,是参与卵巢癌转移的重要基因,可能作为抑制卵巢癌转移的新的靶向分子。

关键词：PRKC咨、卵巢癌、迁移、侵袭、MMP10

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学青年基金81302275;苏州市科技局项目SYS201463

在线出版日期：2015-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：651-655