Pin1siRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响
目的:通过小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1)表达,探讨Pin1对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响.方法:构建pGPU6/GFP/Neo-Pin1 siRNA表达载体,脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中;实验设3组:实验组(SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组)、阴性对照组(SiHa/pGPU6-con组)和空白对照组(SiHa).采用RT-PCR、Western blot法检测Pin1的表达;MTT法检测细胞增殖活性;原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡.结果:转染SiHa/pGPU6-Pin1siRNA的SiHa细胞中,Pin1 mRNA和蛋白表达分别下调68.1%和54.8%,细胞增殖显著抑制.TUNEL显示典型细胞凋亡特征,SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的凋亡指数(AI)为(29.6±14.58)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(8.44±5.65)%]和空白对照组[(5.34±4.47)%](P<0.05).SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的细胞凋亡率为(30.95±16.47)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(6.18±6.10)%]和空白对照组[(5.95±4.99)%](P<0.05).结论:RNA干扰技术能特异高效的抑制Pin1基因的表达,Pin1基因的下调能抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示Pin1可能成为治疗宫颈癌的新靶点.
RNA干扰、肽基脯氨酰顺反异构酶、宫颈癌细胞、增殖、凋亡
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R711(妇产科学)
国家自然科学基金资助项目81072134;上海市浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划PWRq2010-05;同济大学青年优秀人才培养计划2011KJ008
2013-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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