UHRF1基因在人卵巢癌细胞株OVCAR-3中的表达及意义
目的:探讨针对UHRF1基因的小干扰RNA(siRNA)转染人卵巢癌细胞株OVCAR-3后UHRF1表达的变化及细胞的增殖和凋亡,为UHRF1基因作为新的靶点治疗卵巢癌提供依据.方法:用siRNA基因沉默技术,将体外化学合成的针对UHRF1基因的siRNA转染至OVCAR-3细胞(转染组),并以转染阴性对照siRNA序列的细胞作为阴性对照组,未经转染的细胞作为空白组；实时荧光定量PCR和Western blot分别检测转染前后细胞UHRF1 mRNA和蛋白表达水平的变化；CCK-8实验和流式细胞术分别检测沉默UHRF1基因后对细胞增殖和凋亡的影响.结果:实时荧光定量PCR结果显示,siRNA转染后UHRF1基因在卵巢癌细胞株OVCAR-3中表达显著降低(P＜0.01).Western blot结果显示,转染组、阴性对照组和空白组细胞UHRF1蛋白相对表达量分别为0.16±0.04、0.33±0.03、0.35±0.07；转染组细胞UHRF1蛋白表达水平显著低于阴性对照组和空白组(P＜0.05),而阴性对照组和空白组之间无显著差异(P＞0.05).CCK-8实验结果显示,转染后48,72,96h,转染组细胞增殖率均显著低于空白组(P＜0.01).流式细胞术结果显示,转染组、阴性对照组细胞凋亡率分别为(15.83±2.22)％、(7.46±2.93)％,差异显著(P＜0.01).结论:UHRF1基因沉默后可显著抑制卵巢癌OVCAR-3细胞UHRF1的表达,并抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
UHRF1基因、卵巢肿瘤、OVCAR-3细胞株、RNA干扰、细胞增殖、凋亡
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R737.31(肿瘤学)
2013-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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