HPV16 E7 siRNA 表达载体对宫颈癌CaSki细胞增殖及成瘤性的影响

摘要：

目的:通过载体介导的RNA干扰技术干扰E7癌基因的表达,探讨HPV16 E7 小干扰RNA(siRNA)表达载体对宫颈癌CaSki细胞增殖及成瘤性的影响,以及成为宫颈癌基因治疗新策略的可行性.方法:利用脂质体将HPV16 E7特异性siRNA表达载体、空载体转染CaSki细胞,分别命名为CaSki-S、CaSki-P.通过荧光定量RT-PCR及流式细胞仪检测CaSki、CaSki-S、CaSki-P 3种细胞E7 mRNA和蛋白的变化,通过流式细胞仪及MTT法检测3种细胞的细胞周期及生长曲线变化,并检测3种细胞在裸鼠体内成瘤性及生长活性的差异. 结果:荧光定量RT-PCR及流式细胞仪检测显示,CaSki-S细胞E7基因mRNA和蛋白的表达明显低于CaSki细胞,抑制率分别为92.86%、84.21%.MTT法检测显示,CaSki-S细胞生长明显慢于CaSki细胞.流式细胞仪检测细胞周期显示,CaSki-S细胞与未转染组CaSki细胞比较,G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例则明显减少.裸鼠体内成瘤性及生长活性显示CaSki-S细胞显著低于CaSki细胞.而CaSki-P细胞无论是在E7 mRNA和蛋白的表达,还是在肿瘤细胞生长、细胞周期的改变及成瘤性方面都与CaSki细胞无明显差异.结论:HPV16 E7 siRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达,部分逆转其恶性表型.因此它有望成为宫颈癌基因治疗的新策略之一.

关键词：人乳头状瘤病毒16E7、siRNA表达载体、宫颈肿瘤、基因疗法

所属期刊栏目：16

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30371483

在线出版日期：2007-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：186-190