茶树CsbHLH71基因克隆及转录活性分析

摘要：

bHLH转录因子在植物类黄酮代谢过程中具有重要调控作用.该研究采用PCR方法,从'碧香早'茶树中获得了与儿茶素含量高度负相关的CsbHLH71基因,并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位及转录活性分析,为探究CsbHLH71基因在调控茶树儿茶素生物合成的分子机制奠定基础.结果表明:(1)通过RNA-seq测序筛选成功获得一个茶树CsbHLH71基因,该基因CDS序列全长912 bp,编码303个氨基酸;氨基酸序列第101-160位含有一个碱性螺旋-环-螺旋保守结构域,属于bHLH家族转录因子;序列对比和系统进化树结果显示,其与杜鹃花、河滨葡萄等物种的bHLH氨基酸序列有较高的相似性.(2)qRT-PCR结果显示,不同浓度微生物肥处理下茶树CsbHLH71基因的表达水平显著上调,且在1000倍处理下效果最显著,说明高浓度的微生物肥能促进茶树Cs-bHLH71基因的表达.(3)亚细胞定位分析表明CsbHLH71蛋白定位在细胞核.(4)转录活性分析发现,茶树Cs-bHLH71蛋白在酵母和烟草中均具有转录抑制活性,为转录抑制子,证实了CsbHLH71蛋白具有转录抑制剂的功能.研究推测,CsbHLH71蛋白可能负调控茶树中儿茶素积累.

关键词：茶树、bHLH、亚细胞定位、转录活性分析

所属期刊栏目：43

分类号：Q786;Q789;S571.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省自然科学基金项目;长沙市杰出创新青年培养计划;中央引导地方科技发展项目

在线出版日期：2023-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：37-44