拟南芥类受体蛋白激酶基因CRK45对外源钙离子的响应

摘要：

以拟南芥野生型和类受体蛋白激酶基因CRK45的T-DNA插入突变体crk45为材料,采用差异基因表达筛选技术检测ABA处理后野生型和crk45中基因表达的差异.结果显示:(1)crk45突变体中有1个基因的表达比野生型高约4倍.(2)NCBI数据库检索表明,该基因编码的蛋白具有EF手型结构,蛋白序列全长为130个氨基酸,是典型的Ca2+结合蛋白,故命名为CRK45抑制的钙离子结合蛋白(CICBP).(3) Northern blotting分析结果显示,ABA处理后crk45突变体中CICBP的表达明显升高,证明CICBP基因的确受ABA诱导,且其表达受CRK45的抑制.(4)外源75 mmol/L的Ca2+处理后,crk45突变体的萌发率(30.8％)显著高于野生型(17.16％),说明在Ca2+介导下CRK45的功能是抑制种子萌发.(5) qRT-PCR检测显示,野生型中CRK45的表达受Ca2+诱导明显升高,而crk45突变体中的表达一直保持很低,说明crk45突变体是一个基因敲除突变体;Ca2+处理后crk45突变体中CICBP基因表达上调,而野生型中CICBP的表达反而降低,说明Ca2+处理下CRK45抑制CICBP基因的表达.研究表明,ABA或Ca2+处理后,CRK45通过负调控CICBP基因的表达,从而抑制拟南芥种子萌发.

关键词：拟南芥、CRK45、差异表达、钙离子、CICBP

所属期刊栏目：32

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30860030;教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-08-0871;内蒙古农业大学科技创新团队培育计划NDPYTD2010-3

在线出版日期：2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1719-1725