转天山雪莲冷调节蛋白基因烟草的获得及其抗寒性鉴定

摘要：

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF)；构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析.结果表明:(1)siCOR大小661 bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04％).(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快；在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻.研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征.

关键词：天山雪莲、siCOR基因、烟草、抗寒性

所属期刊栏目：32

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目30960034,31160049;国家转基因专项2011ZX08005-004

在线出版日期：2012-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

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