膜荚黄芪种子中2种几丁质酶的分离纯化及活性测定

摘要：

运用传统的层析技术对膜荚黄芪种子中两种几丁质酶进行分离纯化,并对分离纯化中各个步骤得到的蛋白进行了活性研究.结果表明:(1)粗提液的硫酸铵沉淀经再生几丁质亲和柱和凝胶过滤层析Sephadex G-75得到几丁质酶A.(2)粗提液的硫酸铵沉淀经离子交换色谱DE-52、CM、凝胶过滤层析Sephadex G-75得到几丁质酶B.(3)几丁质酶A、B的比活性分别为35.6 U/mg和4.1 U/mg.(4)从膜荚黄芪种子中分离纯化的几丁质酶A和B均为糖蛋白,含糖量分别为6.1%和5.8%.(5) SDS-PAGE显示,几丁质酶A、B的分子量分别为35.5 ku、39.6 ku;凝胶过滤层析测定几丁质酶A、B的分子量分别为36.9 ku、40.8 ku;表明几丁质酶A、B均为单亚基蛋白.

关键词：黄芪种子、几丁质酶、纯化、亲和层析

所属期刊栏目：29

分类号：Q503(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金20502032;教育部"新世纪优秀人才支持计划"NCET-08-0534

在线出版日期：2010-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2521-2526