水仙单染色体特异文库的构建

摘要：

采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到一个多花水仙(Narcissus tazetta L.,2n=22)品种的中着丝粒单染色体,将分离到的单染色体放入0.2 mL Eppendorf管中,经去蛋白、、Sau、3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上、Sau、3A人工接头后,进行两轮PCR扩增,得到0.3～3.0 kb之间的DNA片段.用水仙基因组DNA标记作探针,与扩增产物进行Southern杂交,从而证明单染色体DNA确实已被成功地扩增.将第二轮PCR产物构建质粒文库,随机挑取90个重组子进行分析,发现插入片段主要在600～2 500 bp之间.

关键词：水仙、微分离、单染色体、微克隆

所属期刊栏目：26

分类号：Q785;Q247(基因工程（遗传工程）)

资助基金：福建农林大学校科研和教改项目05B02

在线出版日期：2006-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：305-308