固定化蛋白质色谱模型的建立及其在先导化合物筛选中的应用

摘要：

目的 建立基于固定化蛋白质的色谱模型,并将其应用于先导化合物的快速筛选和初步评价.方法 构建融合卤代烷烃脱卤素酶标签(halogenated alkane dehalogenase tagged,Halo-tagged)的β2-肾上腺素受体(β2-adrenoceptor,β2-AR)重组质粒,用热击法将该重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),经诱导表达获得大量融合Halo-tag的β2-AR,通过Halo-tag与6-氯己酸修饰的微球的特异性反应将细胞裂解液中的β2-AR一 步捕获至硅胶表面,获得β2-AR色谱固定相,用该色谱固定相测定甲氧那明、沙丁胺醇和妥布特罗的结合常数为4.9×103、9.9×103、2.0×104 L·mol-1,对应的解离速率常数为8.1、13.8、5.7 s-1,建立固定化蛋白质色谱模型.结果 用该方法对先导化合物XC267的成药性进行评价,测得其与β2-AR的结合常数为4.4×103 L·mol-1、解离速率常数为8.7s-1,证实XC267是β2-AR的潜在激动剂.结论 建立的固定化蛋白质色谱模型能用于先导化合物的筛选和快速评价,方法特异性高,稳定性好,为其他先导化合物的前期评价提供了方法学借鉴.

关键词：固定化蛋白质、β2-肾上腺素受体、色谱

所属期刊栏目：38

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：陕西省西安市科技计划项目

在线出版日期：2023-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：37-41