基于SNAP-tag-EGFR细胞膜色谱的北豆根中潜在抗肿瘤活性组分筛选及验证

摘要：

目的 从北豆根中筛选与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)作用的活性成分,为抗肿瘤药物研究提供新的先导化合物.方法 构建SNAP-tag-EGFR细胞膜色谱模型,将其与高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱构成二维联用系统,靶向筛选北豆根中EGFR的潜在抗肿瘤活性组分.用前沿分析和计算机模拟分子对接研究潜在活性组分与EGFR的相互作用.并用细胞增殖抑制实验初步验证潜在抗肿瘤活性组分的药理作用.结果 利用该二维联用系统从北豆根提取物中识别出目标组分蝙蝠葛苏林碱和蝙蝠葛碱.前沿分析测得蝙蝠葛苏林碱、蝙蝠葛碱与EGFR相互作用的平衡解离常数KD值分别为2.48×10-6、3.57×10-6 mol·L-1,表明蝙蝠葛苏林碱、蝙蝠葛碱与EGFR均存在一定强度的相互作用关系.分子对接实验表明蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱均可结合于EGFR的活性腔,与EGFR的氨基酸残基形成氢键.细胞增殖抑制实验结果显示,蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱在5～100μmol·L-1范围内能够剂量依赖地抑制SNAP-tag-EGFR/人胚肾细胞293(human embryonic kidney 293,HEK293)的增殖,当给药浓度为50μmol·L-1时,蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱对SNAP-tag-EGFR/HEK293细胞生长的抑制率可达到80.59％±3.74％、73.70％±6.93％.结论 SNAP-tag-EGFR/CMC模型和高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱联用为在天然产物中快速寻找先导化合物提供了平台,为中药活性组分的作用机制研究奠定了基础.

关键词：北豆根、中药、细胞膜色谱、抗EGFR活性

所属期刊栏目：38

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6