靶向SD F-1通过调控肿瘤相关巨噬细胞亚型增强结直肠癌化疗敏感性的作用

摘要：

目的 探究靶向基质细胞衍生因子-1(SDF-1)调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)亚型转化增强结直肠癌(CRC)化疗敏感性的作用.方法 使用PMA和IL-4体外诱导THP-1细胞为TAMs细胞,流式细胞仪检测M1/M2型特异表面标志物CD86和CD206表达;使用5μg/mL SDF-1抑制剂AMD3100处理TAMs细胞24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SDF-1表达,qRT-PCR检测iNOS、TNF-α、TGF-β及Arg-1表达;建立人结直肠癌细胞LoVo和TAMs细胞共培养体系,并使用不同浓度0、0.5、5、50、500μmol/L奥沙利铂处理LoVo细胞,具体分组包括空白对照组、奥沙利铂组、TAMs+奥沙利铂组、AMD3100+TAMs+奥沙利铂组,CCK-8法检测LoVo细胞存活率;构建动物结直肠癌移植瘤模型,待肿瘤长出后选择肿瘤大小为100 mm3的12只裸鼠,按随机数字表法分为对照组、奥沙利铂组、AMD3100+奥沙利铂组,每组4只,奥沙利铂组腹腔注射8 mg/kg奥沙利铂,AMD3100+奥沙利铂组腹腔注射5 mg/kg SDF-1抑制剂AMD3100和8 mg/kg奥沙利铂,对照组注射等体积生理盐水,每日一次,持续18 d,首次给药后的第0、3、6、9、12、15、18 d测量裸鼠肿瘤体积,18 d解剖取肿瘤组织并称重,制备肿瘤组织单细胞悬液,流式细胞仪分选M1/M2型巨噬细胞,免疫组织化学染色检测iNOS和Arg-1表达.结果 体外成功诱导获得TAMs细胞,经过SDF-1抑制剂AMD3100处理后,TAMs细胞中SDF-1在mRNA和蛋白上的表达水平均下调,iNOS、TNF-α的mRNA相对表达量升高,TGF-β、Arg-1的mRNA相对表达量降低(P<0.01);0.5、5、50、500μmol/L奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率下降,与TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率升高,而与SDF-1抑制剂AMD3100处理的TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率则下降(P<0.01);经过奥沙利铂处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长减缓,肿瘤重量减小,经过SDF-1抑制剂AMD3100和奥沙利铂联合处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长进一步减缓,肿瘤重量减小,同时,肿瘤组织中F4/80+CD11c+表达增加,iNOS表达增加,F4/80+CD206+表达减少,Arg-1表达也减少.结论 通过SDF-1抑制剂AMD3100靶向SDF-1可在体外、体内增强结直肠癌的化疗敏感性,其作用机制可能与调控肿瘤相关巨噬细胞M1/M2亚型转化相关.

关键词：基质细胞衍生因子-1、结直肠癌、化疗敏感性、肿瘤相关巨噬细胞

所属期刊栏目：38

分类号：R735.3+;R735.3+7(肿瘤学)

资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目2019D01C162

在线出版日期：2023-02-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：57-64,71