丝氨酸精氨酸蛋白激酶1在体外促进HepG2细胞干性的获得

摘要：

目的 研究丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2肿瘤干性的作用.方法 从GEPIA2数据库获得TCGA中关于肝细胞肝癌(LIHC)的数据,分析SRPK1表达在癌组织及正常样本的差异,以及与患者生存时间、临床分期的关系.采用TIMER数据库分析SRPK1表达与肝癌组织中浸润免疫细胞的相关性.构建SRPK1过表达和抑表达的HepG2稳转细胞株,并根据SRPK1表达差异分为SRPK1组及对照的Vector组,shRNA组及对照的Scramble组,Western blot检测4组细胞株SRPK1的蛋白水平.体外成球实验检测肿瘤细胞的成球能力,流式细胞术检测侧群(SP)细胞在细胞群中的比例.实时荧光定量PCR比较细胞肿瘤干性标记物Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA水平.基因集合富集分析(GSEA)预测SRPK1与Wnt/β-catenin通路的相关程度.结果 SRPK1表达在LIHC患者肿瘤组织中显著高于正常组织(P<0.05),在患者各个分期中表达有差异(P<0.05),高表达SRPK1患者生存率低于低表达SRPK1患者(P<0.05),肝癌组织中SRPK1与B细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突细胞的浸润水平均相关(P<0.05).Western blot结果显示SRPK1组SRPK1蛋白相对表达量高于Vector组(P<0.01),shRNA组则低于Scramble组(P<0.01).SRPK1组肿瘤细胞成球率(SFE)、SP细胞比例、Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA相对表达量均高于Vector组(P<0.05),shRNA组低于Scramble组(P<0.05).GSEA结果显示LIHC中SRPK1高表达与Wnt/β-catenin通路活化正相关(P<0.05).结论 SRPK1促进HepG2细胞肿瘤干性的获得.

关键词：丝氨酸精氨酸蛋白激酶1、HepG2细胞、肿瘤干性、Wnt/β-catenin通路

所属期刊栏目：34

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：广东省医学科学技术研究基金项目;广东省医学科学技术研究基金项目;广州市卫生健康科技项目;广州市卫生健康科技项目

在线出版日期：2023-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1729-1735,1742