miR-214靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路对糖尿病肾病大鼠的保护机制

摘要：

目的 探讨微小RNA(miR-214)靶向磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠的氧化应激和肾间质纤维化的作用和机制.方法 将40只SD雄性大鼠分为对照组(control组)、模型组(DN组)、miR-214阴性对照组(DN+miR-NC组)和miR-214模拟物组(DN+miR-214 mimics组),每组10只;qRT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-214的表达;电子天平称量各组大鼠体质量和肾质量,计算肾指数;血糖仪测定各组大鼠的空腹血糖(FPG);双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白(UP)水平;全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Scr)和血清尿素氮(BUN)的水平;HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化;Masson染色观察各组大鼠肾组织间质纤维化;ELISA检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的表达;免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达;生物信息学工具预测靶基因;双荧光素酶报告基因检测基因或蛋白之间的相互作用;Western blot检测各组大鼠肾组织中PTEN、p-PI3K、p-AKT和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达.结果 miR-214在DN大鼠肾组织中呈低表达,在DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中表达显著上调(均P＜0.001);miR-214 mimics使大鼠的体质量升高,肾指数、FPG、UP、Scr及BUN水平下调(均P＜0.05);DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中肾间质中的炎性细胞浸润减少,胶原纤维沉积减少(P＜0.01);miR-214 mimics使大鼠血清中MDA的水平降低,SOD、GSH、GSH-PX的水平升高(均P＜0.05),大鼠肾组织中TGF-β1的表达水平下降(P＜0.05);miR-214与PTEN存在靶向关系;miR-214 mimics使大鼠肾组织中PTEN蛋白表达下调,p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达上调(均P＜0.05).结论 miR-214在DN大鼠肾组织中低表达,过表达miR-214对DN大鼠的肾组织有保护作用,可能与降低肾组织的氧化应激水平、TGF-β1蛋白表达和抑制PI3K/AKT通路激活有关.

关键词：糖尿病肾病、微小RNA、磷酸酶与张力蛋白同源物、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、氧化应激、肾间质纤维化

所属期刊栏目：34

分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：江西省卫生计生委科技计划项目20194021

在线出版日期：2022-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：360-366,374