下调LncRNA KCNQ1OT1对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

摘要：

目的 探讨lncRNA KCNQ1OT1(KCNQ1OT1)对喉癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响和作用机制.方法 细胞按转染质粒不同分组为:siRNA NC组、KCNQ1OT1 siRNA组;mimics NC组、miR-138 mimics组;KCNQ1OT1 wt+mimics NC组、KCNQ1OT1 wt+miR-138 mimics组、KCNQ1OT1 mut+mimics NC组、KCNQ1OT1 mut+miR-138 mimics组;pcDNA-3.1(+)+mimics NC组、pcDNA-KCNQ1OT1+mimics NC组、miR-138 mimics+pcDNA-3.1(+)组、pcDNA-KCNQ1OT1+miR-138 mimics组;FAK wt+mimics NC组、FAK wt+miR-138 mimics组、FAK mut+mimics NC组、FAK mut+miR-138 mimics组;Control组、Y15组、inhibitor NC组、miR-138 inhibitor组、miR-138 inhibitor+Y15组.分别采用CCK-8实验、细胞侵袭实验和Western blot检测细胞增殖、侵袭和EM T能力.RT-qPCR检测KCNQ1OT1在Hep-2和HLEC细胞中的表达;采用miRanda和双荧光素酶报告基因实验分析KCNQ1OT1和miR-138之间的关系;TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-138和FAK的关系;采用Western blot检测过表达及下调miR-138后Hep-2细胞中FAK、Src、MAPK蛋白磷酸化水平;检测下调miR-138激活FAK/Src/MAPK信号通路对Hep-2细胞增殖、侵袭与EMT的影响.结果 Hep-2细胞中KCNQ1OT1表达量明显上升(P<0.01),miR-138表达量下降(P<0.05);敲低KCNQ1OT1抑制了Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT.KCNQ1OT13′U T R靶向miR-138.敲低miR-138促进了Hep-2细胞增殖、侵袭与EM T,过表达miR-138则起到抑制作用.与过表达miR-138相比,同时过表达KCNQ1OT1和miR-138能部分逆转miR-138上调对细胞增殖、侵袭和EM T的影响.miR-138靶向FAK,敲低miR-138使FAK、Src、MAPK蛋白磷酸化水平升高,过表达miR-138则降低FAK、Src、MAPK蛋白磷酸化水平.沉默miR-138能够激活FAK/Src/MAPK通路促进细胞增殖、侵袭和EMT.结论 下调LncRNA KCNQ1OT1通过miR-138/FAk/Src/MAPK轴抑制喉癌的增殖、侵袭和EMT.

关键词：KCNQ1OT1;miR-138;喉癌;增殖;侵袭;FAk/Src/MAPK

所属期刊栏目：33

分类号：R739.65(肿瘤学)

资助基金：海南省卫生健康行业科研项目19A200082

在线出版日期：2021-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1428-1435