miR-204-5p对卵巢早衰大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的调控机制

摘要：

目的 探讨微小RNA(miR)-204-5p对卵巢早衰(POF)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及调控机制.方法 体外分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),将含有miR-204-5p基因反义寡核苷酸序列的重组慢病毒载体转入BMSCs,获得稳定转染LV-rno-ASO-miR-204-5p的BMSCs细胞.选取动情周期正常的75只SPF级雌性Wistar大鼠,随机分为对照组、POF组、BMSCs组、shRNA组、shRNA-BMSCs组,每组各15只.除对照组外,均采用腹腔注射顺铂法制备POF模型.shRNA组、BMSCs组及shRNA-BMSCs组分别双侧卵巢注射慢病毒载体、BMSCs细胞及稳定转染慢病毒载体的BMSCs细胞,对照组和POF组注射生理盐水.观察各组动情周期恢复情况,比较各组干预前、干预28 d后血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)水平,观察卵巢组织形态、卵泡颗粒细胞凋亡率,检测卵巢组织miR-204-5p mRNA及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和蛋白表达.结果 干预后,POF组大鼠动情周期未恢复;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组动情周期均有所恢复,其中shRNA-BMSCs组动情周期恢复率均高于BMSCs组及shRNA组(P<0.05).病理染色显示,BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量均多于POF组,但仍少于对照组(P<0.05);shRNA-BMSCs组上述各级卵泡数量多于BMSCs组和shRNA组(P<0.05).BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清FSH水平、卵巢颗粒细胞凋亡率、卵巢组织中miR-204-5p mRNA及MAPK、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量均低于POF组,且shRNA-BMSCs组低于BMSCs组和shRNA组,但仍高于对照组(P<0.05);BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清E2水平及卵巢组织Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于POF组,且shRNA-BMSCs组高于BMSCs组和shRNA组,但仍低于对照组(P<0.05).shRNA组与BMSCs组比较,卵巢组织miR-204-5p mRNA相对表达量较低(P<0.05),各级卵泡数量、血清FSH、E2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率及卵巢组织MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 下调miR-204-5p表达可增强BMSCs对POF大鼠卵巢结构和功能的改善作用,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,可能与下调MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因和蛋白表达有关.

关键词：卵巢早衰、微小RNA-204-5p、卵巢颗粒细胞、凋亡、大鼠

所属期刊栏目：33

分类号：R711.5(妇产科学)

资助基金：国家自然科学基金81803277

在线出版日期：2021-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：636-643,649