miR-449a靶向DLL1调控骨关节炎软骨细胞的凋亡

摘要：

目的 探讨miR-449a对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响及机制.方法 体外分离培养人正常软骨细胞和OA软骨细胞,采用实时荧光定量PCR检测miR-449a的表达.将体外培养的OA软骨细胞分为miR-449amimics组(转染miR-449amimics)、mimics-NC组(转染miR-449a mimics阴性对照)、miR-449a inhibitor组(转染miR-449ainhibitor)和inhibitor-NC组(转染miR-449a inhibitor阴性时照)4组,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-449a表达,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-449a与Delta样配体I(DLL1)的靶向关系,免疫印迹法检测miR-449a对DLL1蛋白表达的影响;通过转染DLL1干扰序列siRNA-DLL1和DLL1过表达质粒GFP-DLL1构建DLL1低表达和过表达的OA软骨细胞,观察DLL1对OA软骨细胞凋亡的影响.结果 与人正常软骨细胞比较,OA软骨细胞中miR-449a的表达水平明显升高(P＜0.05).与mimics-NC组比较,miR-449a mimics组细胞中miR-449a表达水平和细胞凋亡率明显升高;而miR-449a inhibitor组细胞中miR-449a的表达水平和细胞凋亡率较inhibitor-NC组明显降低(均P＜0.05).DLL1是miR-449a的潜在靶基因,miR-449a可负向调控DLL1蛋白的表达.DLL1低表达的OA软骨细胞凋亡率较相应对照siRNA-NC组明显升高,而DLL1过表达后OA软骨细胞凋亡率较相应对照GFP组明显降低(P＜0.05).结论 miR-449a可通过靶向调控DLL1表达促进OA软骨细胞凋亡.

关键词：骨关节炎、miR-449a、软骨细胞、细胞凋亡、Delta样配体1

所属期刊栏目：32

分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2020-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1754-1758