10.3969/j.issn.1672-3511.2020.09.009
miR-129-5p靶向LARP1基因调控肺癌细胞顺铂耐药
目的 探讨miR-129-5p能否通过调控La相关蛋白1(LARP1)表达,从而调节肺癌细胞对顺铂(DDP)的敏感性.方法 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印记(Western blot)检测肺癌细胞A549和肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP中miR-129-5p、LARP1以及多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达水平.将A549/DDP分为对照组(NC)、miR-con组、miR-129-5p组、si-con组和si-LARP1组、miR-129-5p+ pcDNA-con组、miR-129-5p+ pcDNA-LARP1组.细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率和对顺铂的半数抑制浓度(IC50).Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和MRP1蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测验证miR-129-5p和LARP1的靶向调控关系.结果 与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-129-5p的表达水平降低,LARP1和MRP1的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与miR-con组比较,miR-129-5p组A549/DDP细胞存活率、IC50、CyclinD1和MRP1蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与si-con组比较,si-LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50降低,CyclinD1和MRP1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与miR-129-5p+ pcDNA-con组比较,miR-129-5p+pcDNA-LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50升高,CyclinD1和MRP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05).LARP1是miR-129-5p的靶基因.过表达miR-129-5p后LARP1蛋白表达降低,沉默miR-129-5p后LARP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-129-5p通过靶向下调LARP1表达抑制肺癌细胞增殖,提高肺癌细胞的顺铂敏感性.
肺癌细胞、miR-129-5p、LARP1、顺铂耐药、敏感性
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R734.2(肿瘤学)
邢台市科学技术研究;发展指导计划项目
2020-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1298-1303