miR-33b-3p通过靶向CDKN1A调控软骨细胞增殖与凋亡及ECM降解

摘要：

目的 探讨miR-33b-3p对软骨细胞增殖、凋亡及ECM降解的影响.方法 将miR-33b-3p mimics和miR-33b-3p inhibitors转染软骨细胞,通过CCK-8法检测软骨细胞的增殖情况,利用流式细胞术检测软骨细胞的凋亡百分数,RT-PCR及Western blot实验检测周期相关蛋白CyclinD1、CyclinE1、p21和凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase9、Bax以及ECM降解相关蛋白TIMPs、MMP-9、EMMPRIN的表达水平.荧光素酶活性分析实验检测CDKN1A是miR-33b-3p的作用靶点,最后将已构建的过表达pcDNA3.1-CDKN1A质粒转染软骨细胞,通过Western blot实验检测软骨细胞中CyclinD1、CyclinE1、p21、Bcl-2、caspase9、Bax以及TIMPs、MMP-9、EMMPRIN的表达水平.结果 与软骨细胞相比,miR-33b-3p mimic组细胞明显减少;细胞凋亡数显著升高;CyclinD1、CyclinE1表达下降,p21表达升高;Bcl-2表达下降,caspase9、Bax表达升高;TIMPs表达升高,MMP-9、EMMPRIN表达下降.miR-33b-3p靶向作用于CDKN1A基因的3'非翻译区(3'UTR).与空白软骨细胞相比,过表达pcDNA3.1-CDKN1A质粒后,能够促进软骨细胞的增殖,抑制细胞的凋亡,促进ECM的降解.结论 miR-33b-3p通过靶向作用于CDKN1A基因的3'UTR,抑制软骨细胞的增殖,促进软骨细胞的凋亡,以及抑制软骨细胞ECM的降解.

关键词：软骨细胞、miR-33 b-3p、CDKN1A、细胞增殖和凋亡、ECM降解

所属期刊栏目：32

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：保定市科技计划项目18ZF011

在线出版日期：2020-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1115-1121