促红细胞生成素原核表达载体构建分离纯化

摘要：

目的 构建和表达人源性促红细胞生成素(EPO),为促红细胞生成素发挥功能与结构差异研究做准备.方法 通过NCBI查找人源性促红细胞生成素全基因序列并合成,构建原核表达载体pTWIN1-rhEPO,转化至大肠杆菌BL21 (DE3),获得高效表达重组转化子菌株.结果 成功构建人源性促红细胞生成素原核表达载体,经酶切和DNA序列测序分析,结果表明该基因序列与合成序列完全相同.终浓度0.5mmol/L ITPG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,4小时时蛋白表达量最高.结论 构建和表达重组载体pTWIN1-rhEPO,分离纯化出目的蛋白,为进一步研究促红细胞生成素组织修复功能及突变体相关功能研究奠定基础.

关键词：促红细胞生成素、表达载体构建、原核表达、分离纯化

所属期刊栏目：27

分类号：R331.1+4(人体生理学)

资助基金：国家基础科学人才培养基金J1103604

在线出版日期：2015-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1131-1134