miR-34在小鼠心脏组织中的表达和功能研究

摘要：

目的 探讨miR-34家族中miR-34a、miR-34b、miR-34c在心脏组织的表达情况,确定这个家族中哪一个microRNA是主要表达形式;并比较miR-34家族在年轻小鼠心脏和老年小鼠心脏的表达差异,检测其中哪一个成员对由衰老引起的心脏功能退化具有敏感性,可作为心脏功能的检测标志.方法 提取小鼠心脏总RNA,对miRNA采用加尾法,反转成cDNA.使用RT-PCR的方式检测miR-34a、miR-34b、miR-34c引物的特异性.随后使用实时荧光定量PCR的方法检测miR-34a、miR-34b、miR-34c三个基因在心脏细胞中的表达差异.同时比较年轻小鼠和老年小鼠心脏组织中的miR-34a、miR-34b、miR-34c表达量.结果 提取的总RNA经检测符合要求,反转成cDNA后分别用miR-34a、miR-34b、miR-34c的荧光定量PCR引物检测,确认引物特异性极好,只有单一条带,可以进行下游荧光定量实验.在小鼠心脏组织中miR-34a的表达量较miR-34b和miR-34c高,说明miR-34a在miR-34家族中起主导作用.在老年小鼠心脏中miR-34a的表达量高于年轻小鼠(2.5倍).miR-34b在老年小鼠心脏中也有部分上调(1.4倍),而miR-34c在年轻小鼠和老年小鼠心脏中无明显变化.结论 在miR-34家族中,miR-34a的表达起主导地位,表达量高于miR-34b、miR-34c.随着年龄增加,miR-34a、miR-34b在老年小鼠心脏的表达量比年轻小鼠心脏要高,其中miR-34a 2.5倍的增幅明显大于miR-34b 1.4倍的增幅.故可将miR-34a作为心脏由衰老引起的功能退化的标志基因,也可作诊断心脏功能的重要指标.

关键词：miR-34、心脏、衰老

所属期刊栏目：26

分类号：R393

资助基金：江苏省博士后科研资助计划第一批资助项目1301054C

在线出版日期：2014-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1264-1267