霍乱肠毒素基因DNA疫苗的构建和体外表达

摘要：

目的 构建霍乱弧菌ctxAB融合基因分子佐剂DTA疫苗,并在NIH3T3细胞中进行表达.方法 用限制性核酸内切酶从原核表达重组质粒pET32a-ctxAB上切下ctxAB基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-ctxAB.用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxAB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western blot对pcDNA3.1-ctxAB的瞬时表达产物和稳定表达产物进行鉴定.结果 真核表达重组质粒pcDNA3.1-ctxAB成功转入NIH3T3细胞,利用免疫荧光技术检测到其在细胞膜和细胞浆中获得瞬时表达,对稳定转染细胞用Western blot分析,发现在约40.5kDa处有阳性杂交信号.结论 成功构建霍乱弧菌ctxAB基因分子佐剂DNA疫苗,并在NIH3T3细胞中获得表达.

关键词：霍乱肠毒素、DNA疫苗

所属期刊栏目：19

分类号：R387(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30300302

在线出版日期：2007-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：775-777,780