10.3969/j.issn.1672-3511.2004.03.005
TH基因逆转录病毒表达载体的构建及产病毒细胞系的建立
目的构建含有鼠酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组逆转录病毒表达载体pN2ATH,建立PA317产病毒细胞系.方法将质粒pGEM-2上酶切下的THcDNA片段与线性化的逆转录病毒表达载体N2A连接,克隆出重组逆转录病毒表达载体pN2ATH.把pN2ATH质粒转入PA317包装细胞,通过G418抗性筛选,NIH3T3细胞测定病毒滴度,得到高滴度产毒PA317/pN2ATH细胞株,免疫组化测定细胞TH表达.结果重组质粒pN2ATH经酶切鉴定证明THcDNA正向插入N2A表达载体中,PA317/pN2ATH产毒细胞高效表达TH.结论成功地构建了重组逆转录病毒表达载体pN2ATH,建立了PA317/pN 2A产毒细胞株.
酪氨酸羟化酶、表达载体、逆转录病毒包装细胞、基因转移
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Q78;Q813(基因工程(遗传工程))
2004-09-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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