青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1信号通路改善博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化
目的 探讨青藤碱对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制.方法 培养MRC-5细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以确定青藤碱最佳处理浓度与时间,选取80 μmol/L青藤碱处理MRC-5细胞48 h,或者miR-21模拟物(miR-21 mimic)或1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)小干扰RNA转染MRC-5细胞后,再用青藤碱处理,采用实时荧光定量PCR,Western blot法分别检测miR-21、ADAMTS-1、1型胶原蛋白(Col1)和3型胶原蛋白(Col3)表达.将SD大鼠随机分为对照组、青藤碱组和青藤碱联合miR-21激动剂(miR-21 agomir)组,每组10只.通过博莱霉素A5 一次性注入大鼠气管内构建PF模型,分别给予9 g/L氯化钠溶液、青藤碱、青藤碱联合miR-21 agomir处理,28 d处死大鼠,分离肺组织行HE和Masson染色,实时荧光定量PCR、Western blot法检测ADAMTS-1、Col1和Col3表达,ELISA测定血清1型前胶原羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原氨基端前肽(P3NP)水平.结果 青藤碱下调MRC-5细胞miR-21表达,升高ADAMTS-1水平,促进Col1和Col3降解,干扰miR-21/ADAMTS-1信号通路部分逆转青藤碱对Col1、Col3降解的促进作用.青藤碱减少SD大鼠肺泡炎与PF评分,降低血清P1CP、P3NP水平,上调肺组织ADAMTS-1表达,下调Col1、Col3表达,这些作用被miR-21 agomir逆转.结论 青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1途径促进Col1和Col3降解,抑制大鼠PF.
青藤碱、肺纤维化、微小RNA21(miR-21)、1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、3型胶原蛋白(Col3)
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R285;R392.5;R563;R441.8(中药学)
湖南省教育厅资助科研项目;长沙民政职业技术学院教授;博士科研项目
2023-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
721-728
