猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备
目的 大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清.方法 构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BI21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白.镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Western blot法鉴定.纯化后的A23R蛋白免疫小鼠,制备A23R多克隆抗体,采用ELISA检测抗体免疫滴度.结果 在0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度37℃、诱导20 h时,获得的A23R重组蛋白表达量最大,纯化后的蛋白纯度约为96.07％,经Western blot法鉴定为目的蛋白.重组蛋白免疫小鼠,第6周时IgG抗体的效价达到1:102 400.结论 成功获得高表达和高纯度的重组A23R蛋白,并制备了小鼠抗MPXV-A23R的高效价血清.
猴痘病毒(MPXV)、A23R、表达、纯化、免疫
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Q939.47;R392.11;R392-33(微生物学)
国家自然科学基金;南昌市动物病毒与基因工程重点实验项目;江西省自然科学基金;江西省教育厅科学技术研究基金
2023-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
642-648
