miR-497阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制SGC-7901人胃癌失巢凋亡抵抗细胞的生长和转移
目的 探讨微小RNA497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制.方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中,重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型,集落形成实验、流式细胞术、TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学行为与亲本细胞的差异、荧光定量PCR检测miR-497表达、Western blot法检测无翅基因/β联蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白如波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)等表达的变化;亲本细胞和凋亡抵抗SGC-7901细胞转染miR-497抑制物(miR-497 inhibitor)或miR-497模拟物(miR-497 mimic),CCK-8法检测其增殖活性、TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力、TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移能力、Western blot法检测Wnt1、β-catenin、E-cadherin、vimentin蛋白表达的变化.通过在失巢凋亡抵抗SGC-7901细胞中转染miR-497 mimic,在裸鼠皮下接种,测量并记录肿瘤组织的体积及质量的变化,Western blot法检测Wnt1、β-catenin、E-cadherin、vimentin蛋白表达的变化.结果 与亲本细胞相比,SGC-7901胃癌失巢凋亡抵抗细胞增殖速度更快、集落形成更强,凋亡率更低,侵袭和迁移能力更强,miR-497表达明显下降.下调miR-497后细胞增殖能力显著增强,侵袭、迁移能力明显增强,Wnt1、β-catenin蛋白表达量显著增加,vimentin表达显著增加,E-cadherin表达下降,而上调miR-497表达结果相反.miR-497过表达组的肿瘤组织生长速度、肿瘤的体积与质量明显低于对照组;Wnt1、β-catenin、vimentin蛋白表达量显著下降,而E-cadherin表达明显上调.结论 miR-497在SGC-7901失巢凋亡抵抗细胞中低表达,miR-497通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活化和EMT,抑制胃癌细胞的生长和转移.
miR-497、SGC-7901细胞、Wnt、β联蛋白(β-catenin)、失巢凋亡抵抗
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Q279;R735.2;R573(细胞生物物理学)
安徽省自然科学基金;国家级大学生创新创业训练计划项目;省级大学生创新创业培训计划
2023-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
617-625
