脂多糖诱导人肺血管内皮细胞骨架重构及相关miRNA谱分析
目的 探讨脂多糖(LPS)对人肺血管内皮细胞(HPVEC)骨架的影响及相关差异表达微小RNA(miRNA)谱的生物学分析.方法 通过显微镜观察HPVEC形态,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITTC-phalloidin)染色实验观察细胞骨架、免疫荧光细胞化学染色检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)表达,小管生成实验检测血管生成能力,细胞迁移实验检测细胞迁移能力,JC-1线粒体膜电位检测确定细胞凋亡情况.采用高通量测序检测miRNA表达的变化,筛选出差异表达显著的miRNA,利用预测miRNA靶标基因的软件miRanda和预测miRNA结合位点的软件TargetScan进行靶基因预测,用基因本体论(GO)数据库和京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库对靶基因进行功能富集,进一步对与HPVEC损伤明显相关的miRNA进行生物学分析.结果 LPS诱导HPVEC损伤后形态变圆,细胞骨架完整性破坏,VE-cadherin表达下降,血管形成及迁移能力下降,凋亡增加,测序结果发现差异miRNA共229个,其中上调表达84个,下调表达145个,对这些差异miRNA进行靶基因预测及功能富集分析发现其主要富集于细胞连接及骨架调节、细胞黏附过程、炎症相关通路等通路.结论 在ALI体外模型中,多个miRNA协同参与HPVEC骨架重构、屏障功能降低、血管生成、迁移及凋亡等过程.
人肺血管内皮细胞(HPVEC)、脂多糖(LPS)、屏障功能、微小RNA(miRNA)
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R563;R392;R33;Q731;R965(呼吸系及胸部疾病)
国家自然科学基金;宁夏自然科学基金项目
2023-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
592-598
