兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的 制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体.方法 构建pET-28a-Ccdc189原核表达质粒.将重组质粒转化入大肠杆菌E.coliBL21中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达.将纯化的重组蛋白免疫成年雄性新西兰大白兔,获得兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体.Western blot法、间接ELISA及免疫荧光组织化学染色分析鉴定多克隆抗体特异性.结果 成功构建pET-28a-Ccdc189重组质粒并诱导Ccdc189重组蛋白表达.ELISA检测多克隆抗 体效价为1∶1 000 000,Western blot法及免疫荧光组织化学染色显示Ccdc189多克隆抗体能特异性识别Ccdc189原核蛋白及成年野生型小鼠睾丸组织中的Ccdc189蛋白.结论 成功制备了特异性强的兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体.

关键词：卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：39

分类号：R392.11;Q518.1

资助基金：国家自然科学基金;江苏省研究生科研创新计划项目

在线出版日期：2023-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：456-462