自然杀伤细胞来源外泌体的miR-30e-3p抑制人食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭
目的 研究自然杀伤(NK)细胞来源外泌体的miR-30e-3p对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 从健康供体的外周血中分离和扩增NK细胞,并分离NK细胞外泌体(EXO)进行鉴定.NK细胞外泌体与NEC细胞进行共培养,随机分为Exo1和Exo2组.采用透射电子显微镜观察外泌体形态及大小.Western blot法检测外泌体凋亡相关基因2相互作用蛋白X(ALIX)、抗肿瘤易感基因101(TSG101)、CD81、钙联蛋白(calnexin)表达.将miR-30e-3p模拟物(miR-30e-3p mimic)、miR-30e-3p抑制物(miR-30e-3p inhibitor)及阴性对照(miR-NC)转入NK细胞,并分离相应的外泌体与NEC细胞进行共培养.CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力.实时定量PCR检测NCE细胞和外泌体中miR-23b、miR-422a、miR-133b、miR-124、miR-30e-3p和miR-99a的表达.结果 NK细胞中CD56+CD3+细胞比例为(0.071±0.008)％,CD56+CD16+细胞比例为(90.6±10.6)％.从NK细胞分离的外泌体直径为30～150 nm,且表达ALIX、TSG101、CD81,不表达calnexin.NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭、增加细胞凋亡,降低S期细胞比例并增加G1期细胞比例.过表达miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭,并阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,敲低miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体则相反.结论NK细胞来源外泌体miR-30e-3p阻断人ESCC细胞的细胞周期,抑制其增殖和侵袭并诱导其凋亡.
食管鳞状细胞癌、自然杀伤(NK)细胞、外泌体、miR-30e-3p
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Q279;R392.12(细胞生物物理学)
国家自然科学基金;河南省中医药管理局基金项目
2023-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
295-302
