前列腺特异性膜抗原(PSMA)纳米抗体基因的原核表达及天然噬菌体纳米抗体库筛选

摘要：

目的 筛选出抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)的纳米抗体.方法 利用天然噬菌体纳米抗体库,以PSMA为靶抗原进行三轮的淘选,采用ELISA鉴定阳性克隆,并进行测序分析,将筛选到的阳性克隆基因序列插入pET28a原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖昔(IPTG)诱导重组蛋白的表达,利用Ni柱进行亲和纯化,通过SDS-PAGE验证纯化产物.结果 筛选获得4条PSMA纳米抗体序列重链可变区1(VHH1)、VHH2、VHH3、VHH4,VHH1序列未能获得明确的原核表达蛋白,VHH2、VHH3、VHH4蛋白均表达.纯化后获得了纯度高、相对分子质量(Mr)约为17 000的抗PSMA纳米抗体.结论 通过天然噬菌体纳米抗体库淘筛,成功获得抗PSMA的纳米抗体序列并进行了原核表达和纯化.

关键词：前列腺特异性膜抗原(PSMA)、纳米抗体、噬菌体纳米抗体库、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q511;R392;R392-33(蛋白质)

资助基金：贵州省中央资金支持省级重点专科建设项目;贵州省科技支撑计划;贵州省卫生健康委科学技术基金项目

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1030-1035