表达绿色荧光蛋白的重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型的建立

摘要：

目的 建立表达绿色荧光蛋白(GFP)的耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型,对耻垢分枝杆菌进行快速定位和直观检测,为探究结核发病机制以及研制新型结核疫苗提供一种示踪工具.方法 以pEGFP-N1质粒为模板采用PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列,获得EGFP的编码基因,将扩增产物克隆到载体pALACE上,建立重组质粒pALACE-EGFP.利用电穿孔技术将pALACE-EGFP转化到耻垢分枝杆菌中,通过潮霉素抗性筛选重组耻垢分枝杆菌克隆,扩大培养后涂片观察,并进行荧光显微镜镜检.再用重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞,观察是否有GFP表达.结果 正确构建重组质粒pALACE-EGFP;荧光显微镜下观察重组耻垢分枝杆菌,证实EGFP在重组耻垢分枝杆菌中表达,并且THP-1巨噬细胞被感染后发出绿色荧光.结论 表达EGFP蛋白的重组耻垢分枝杆菌的成功建立,为结核分枝杆菌的感染和致病机制研究奠定基础.

关键词：绿色荧光蛋白(GFP)、耻垢分枝杆菌、结核病

所属期刊栏目：38

分类号：R378.91+1;R825.2;R392.12(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：安徽省自然科学基金;安徽省自然科学基金

在线出版日期：2022-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：789-793