四种血清型登革病毒包膜蛋白结构域Ⅲ(EDⅢ)中和抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 制备四种血清型交叉反应性的登革病毒包膜蛋白结构域Ⅲ(DENV-EDⅢ)特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性及体外中和活性.方法 通过毕赤酵母表达具有良好抗原性的1～4型DENV-EDⅢ蛋白,并以四种DENV血清型EDⅢ蛋白混合免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇融合技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA筛选出稳定分泌抗DENV-EDⅢ抗体的杂交瘤细胞,进一步通过间接免疫荧光法对所获得mAb的特异性进行鉴定,并通过改良的酶联免疫斑点微中和实验对所获得的mAb进行体外中和活性测定.结果 获得6株特异性针对1～4型DENV-EDⅢ蛋白的mAb和11株特异性针对某一血清型DENV的EDⅢ mAb,其中有1株mAb同时对四种血清型DENV有均衡的体外强中和活性,其对四种血清型DENV的半数抑制剂量(IC50)分别为(0.05、1.89、0.02、3.91)μg/mL.结论 成功筛选获得了一株可同时中和四种血清型DENV的ED Ⅲ特异性mAb.

关键词：登革病毒(DENV)、包膜蛋白结构域Ⅲ(EDⅢ)、单克隆抗体(mAb)

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分类号：S718.85;R446.6;Q813.2(林业基础科学)

资助基金：广东省自然科学基金2020A1515011171

在线出版日期：2022-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：748-753